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噻唑蘭(MTT)也稱作溴化噻唑藍四氮唑

發布時間: 2022-05-23  點擊次數: 129次

噻唑蘭(MTT)也稱作溴化噻唑藍四氮唑


噻唑蘭(MTT),也稱作溴化噻唑藍四氮唑,是一種黃色染料,常用來檢測細胞的活力、細胞增殖、以及細胞毒性分析。檢測原理:MTT是一種可接受氫離子的化合物染料,帶正電荷,具有細胞膜滲透性?;罴毎€粒體中的琥珀酸脫氫酶能夠將外源進入的MTT還原成為水不溶性的深藍色MTT-甲臜結晶,而死細胞不具有此功能。甲臜結晶是不能穿透細胞膜,因此沉積在處于增殖且未受損傷的細胞內。甲臜結晶可用DMSO或者酸化的異丙醇溶解出來,酶標儀下測定570 nm的吸光度反映甲臜的生成量。而甲臜的生成量與活細胞數目成正比,用以評估細胞存活狀況。


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分子式:C18H16BrN5S  分子量:414.32


簡介:MTT是一種生物染料。常用于基于MTT檢測方法的細胞活力、細胞增殖或細胞毒性檢測。因為MTT具有正電荷,它可以穿過細胞膜并被線粒體還原形成紫色甲臜染料。溶解MTT甲臜染料需要使用有機溶劑。脫氫酶的檢測,染色法。


別名:噻唑藍(MTT);3-(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide, MTT, Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide

物理性狀及指標:

外觀:……………………黃色或橙色固體

純度:……………………≥98%

溶解性:…………………5mg/ml溶于水、鹽溶液、培養基;溶于甲醇、DMSO,乙醇(20 mg/ml)

熔點: ………………………195℃。

干燥失重: …………………<1.0%

儲存條件:2-8°C,避光防潮密閉干燥


運輸條件:常溫運輸


使用方法

1:接種細胞:用含10%胎牛血清的培養基配制單個細胞懸液,以每孔1000-10000個細胞量接種到96孔板,每孔體積200ul。

2: 培養細胞:正常培養及加藥等處理細胞。

3:呈色:培養及處理完畢后,PBS清洗每孔細胞后,每孔加MTT溶液20ul(5mg/ml用PBS配制,pH=7.4),繼續培養箱孵育4 h。

4: 終止培養:小心吸棄孔內培養上清液,對于懸浮細胞需要離心后再吸棄孔內培養上清液。每孔加150ul DMSO,振蕩10min,使結晶物充分融解。

5:比色:490nm酶聯免疫監測儀上測定各孔光吸收值,記錄結果,以時間為橫坐標,吸光值為縱坐標繪制細胞生長曲線。


用途及描述:科研試劑,廣泛應用于分子生物學,藥理學等科研方面,嚴禁用于人體。MTT產生淡黃色溶液,通過活細胞的線粒體脫氫酶轉化為深藍色甲瓚。用酸化的異丙醇溶解藍色晶體,并在570nm處比色測量強度。

1.藥物(也包括其他處理方式如放射線照射)對體外培養的細胞毒性的測定;

2.細胞增殖及細胞活性測定。


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